牛伪狂犬病诊断方法有哪些？

实验诊断

 

(1)病原学检查。

 

①病料采集：采集脑组织(中脑、小脑、脑桥和延脑)、扁桃体、肺脏、脾脏及淋巴结，其中脑组织是理想的病毒分离材料也可采集鼻咽洗液、患部水肿液作为病料。

 

②直接镜检：伪狂犬病病毒具有疱疹病毒的一般形态特征，病料电镜观察，病毒粒子呈圆形或者椭圆形，**为核芯，内含双股RNA，其外是衣壳，呈20面体立体对称，**外层是病毒囊膜，囊膜表面有纤突。

 

⑧分离培养：脑组织或扁桃体等病料研磨制成l0%病料悬液，每毫升加青霉素1000国际单位、链霉素1000微克处理，离心取上清液用于接种；鼻咽洗液或水肿液离心除去大块沉渣，经青霉素、链霉素处理**用于接种。病料经绒毛尿囊膜接种9～11日龄鸡胚，4天后绒毛尿囊膜出现灰白色斑性病变，胚体弥漫性出血、水肿，因神经系统受侵害而死亡。也可将病料接种猪肾细胞、兔肾细胞及鸡胚成纤维细胞，可出现细胞病变，镜检于病变细胞内可发现核内嗜酸性包涵体。

 

④动物接种试验：病料悬液经抗生素处理后，离心取上清液，皮下或肌肉接种家兔，每只注射1毫升。接种后2—3日，注射局部出现奇痒，家兔表现不安，摩擦或啃咬痒部，使局部脱毛，皮肤破溃出血，随后发生四肢麻痹，衰竭死亡。也可用小鼠或豚鼠进行接种试验。

 

(2)血清学试验。病毒中和试验、琼脂扩散试验、补体结合试验、免疫荧光抗体技术、酶联免疫吸附试验等均可用于伪狂犬病的诊断，其中病毒中和试验敏感性高。

 

类症鉴别：

 

伪狂犬病常与李氏杆菌病、狂犬病等类似疾病进行区别诊断。

 

(1)伪狂犬病与李氏杆菌病的鉴别。牛只感染李氏杆菌病后，一般无皮肤瘙痒症状。血液涂片染色镜检，可见多核巨细胞增多。病料镜检观察，可发现革兰氏阳性的李氏杆菌。病料悬液接种家兔，不出现特殊的瘙痒症状。

 

(2)伪狂犬病与狂犬病的鉴别。狂犬病患畜一般有被患病动物咬伤的病史，病畜兴奋时多有攻击性行为。病料悬液皮下接种家兔，通常不易感染。脑内接种，发病后无皮肤瘙痒症状。

 

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